全血蛋白提取试剂盒

BB-3140
选择规格
  • 50T
  • 100T
价格
  • ¥600元
  • ¥1000元
数量
产品概述 product description

贝博® BBproExtra® 全血总蛋白提取试剂盒提供适用于从各种动物抗凝/非抗凝全血样品中提取总蛋白。 本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解细胞膜组份,包括细胞质膜、核膜和各种细胞器膜。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。 本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。 本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。 本试剂盒中含有EDTA,与金属螯和层析等下游应用不兼容。

保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
检测方法
WB,IP等
适用样本
动物全血
产品特点
1.使用方便,将蛋白提取的时间缩短至30分钟。
2.含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
3.紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
4.蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性,包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
产品应用
WB,IP等
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
使用注意事项:
 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
 蛋白酶抑制剂混合物避免反复冻融。
 如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
 本试剂盒提取的是全血总蛋白,含所有高丰度的白蛋白等。电泳前可以蛋白稀释液稀释至约5 μg/μl。
 电泳加loading buffer后水煮时,蛋白液有时会变得非常粘稠,可以用65℃保温10分钟代替沸水煮。
 对于某些目的蛋白在血清中含量很低的情况,或者目的蛋白与白蛋白分子量相近的情况,可能需要先去除白蛋白。需要根据情况选择。白蛋白等去除试剂盒需要自备。

使用方法
1. 提取液制备:
每500 μl蛋白提取液中加入2 μl蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。
2. 取300 μl全血样本,加入300 μl蛋白提取液,充分混匀后,在4℃条件下振荡20-40分钟。
3. 在4℃,14000×g条件下离心10分钟。
4. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到全血蛋白。
5. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
常见问题分析
1.用什么方法定量蛋白?
建议用BCA法。不适合用Bradford法,因为试剂A中含有干扰Bradford法的组份,导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系,则可以用Bradford法定量。

2.提取的蛋白具有活性吗?
本试剂盒不含有离子型去垢剂组份,不破坏蛋白的结构,没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏,蛋白均保持其天然构象和活性。

3. 电泳蛋白煮样品后成胶状?
全血蛋白样品浓度极高,需要稀释到合适的浓度再进行下游检测。
参考文献
1.Jidong Liu et al.
Genome sequencing analysis of a family with a child displaying severe abdominal distention and recurrent hypoglycemia
Molecular Genetics & Genomic Medicine 2020

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