Bradford 蛋白定量试剂盒

BB-3411
选择规格
  • 250T
  • 1000T
价格
  • ¥180元
  • ¥400元
数量
产品概述 product description

贝博® BBproExtra® Bradford法(考马斯亮蓝法),是目前灵敏度最高的蛋白质测定法之一。当Bradford 染色液(考马斯亮蓝G250)和蛋白在酸性条件下结合时,溶液颜色由棕黑色转为蓝色,最大吸光值波长由456nm 转至595nm,吸光值与蛋白质的含量在一定浓度范围内有较好的线性关系,通过测定吸光值大小并对照标准蛋白的吸光值,推算出蛋白浓度,实现了蛋白浓度测定的快速,稳定和高灵敏度。 Bradford染色液为2倍浓缩母液,便于储存。 Bradford法测定受样品中去垢剂的影响,如果蛋白样品中含有高浓度的去垢剂,可以选用BCA法的试剂盒(相关产品:BB-3401)。 BCA 法快速灵敏、稳定可靠,对不同种类蛋白质检测的变异系数非常小。BCA 法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。在组织细胞蛋白提取过程中,常用浓度的去垢剂SDS,Triton X-100,Tween不影响检测结果,但受螯合剂(EDTA,EGTA)、还原剂(DTT,巯基乙醇)和脂类的影响。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒,例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒;含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒;专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒供选择使用。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物、植物等不同样本的细胞核、线粒体、溶酶体、叶绿体、外泌体等不同细胞器的提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供蛋白浓缩、脱盐、沉淀、透析、定量、电泳、纯化、检测等不同蛋白样品处理检测等相关试剂盒。

保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白标准品注意防止微生物污染。避免反复冻融。
2.可以根据需要将蛋白标准分装后冻存。
3.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
检测方法
酶标仪或分光光度计
适用样本
蛋白样本
产品应用
蛋白定量
仪器准备
1.酶标仪或分光光度计
2.移液器
3.冰箱
4.冰盒


试剂准备
1.纯水 2.生理盐水
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
4.96孔板
使用注意事项
1.Bradford法对于去污剂敏感的,受高浓度去垢剂影响。需确保SDS低于0.1%,Triton X-100低于0.1%,Tween 20,60, 80低于0.06%。含去垢剂的样品推荐使用BestBio贝博的BCA蛋白浓度测定试剂盒。
2.染色液使用前请混匀。
3.将G250染色液放置到室温再使用,有利于提高检测的灵敏度。
使用方法
A. 96孔酶标板测定:
1. 蛋白标准工作液配制:
根据样品数量配制相应体积的蛋白标准工作液。将蛋白标准储存液用双蒸水5倍稀释,配成1mg/ml的工作液。
2. 标准曲线绘制。
取一块酶标板,按以下表格数据加入试剂:
3. 振荡混匀后,室温放置5-10分钟。
4. 用酶标仪测定A595,以不含BSA的光吸收值为空白对照。
5. 以蛋白含量(g)为横坐标,吸光值为纵坐标,绘出标准曲线。
6. 样品测定:
将待测蛋白样品用纯水稀释至适当浓度,取10l样品,加入100l 2x Bradford染色液和90l的纯水,混匀后放置5-10分钟,然后以0号孔为对照,测定样品吸收值A595。
【注】:
 必须用纯水补足体积,不能用PBS等buffer。
7. 根据测得的吸收值,在标准曲线上即可查得样品的蛋白含量。
8. 计算蛋白浓度:
以查得的蛋白含量除以样品体积10l,再乘以相应的稀释倍数即可得到待测样品的实际浓度。

B. 比色皿测定
按照比色皿规格,与以上方法相同,适当按比例增加各溶液体积即可。
参考文献
1.Yihong Caia, He Chena, Xuwei Mo et al.
Toxoplasma gondii inhibits apoptosis via a novel STAT3-miR-17–92-Bim pathway in macrophages
Cellular Signalling 2014

2.Xueping Zhang, Zhongxiang Cai et al.
F-actin may play an important role in IL-1β-stimulated hippocampal neurons
Behavioural Brain Research 2013

3.Dong Hu, Jing Wu et al.
Stage and tissue specific differences in SjBMI1, a Polycomb protein in Schistosoma japonicum
PARASITOLOGY RESEARCH 2010

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