产品概述
product description
线粒体(mitochondria)是真核细胞中产生能量的重要细胞器。细胞中的能源物质—脂肪、糖、部分氨基酸在此进行最终的氧化,并通过偶联磷酸化生成ATP,供给细胞生理活动之需。对线粒体结构与功能的研究通常是在离体的线粒体上进行的。 贝博® BBproExtra® 植物线粒体提取试剂盒用简便快速的方法提取得到线粒体。适用于各种植物组织样本和培养细胞。 本试剂盒提取得到的线粒体为完整的具有生物活性的线粒体,可以用于线粒体功能研究、线粒体蛋白提取等各种下游应用。 本试剂盒采用非酶法的快速提取方法,可以在一小时内快速提取得到植物线粒体,但是回收率比酶法线粒体提取试剂盒稍低。需要酶法提取试剂盒可以联系贝博选择其他货号的试剂盒(相关产品BB-36115),酶法提取得到的线粒体回收率会有增加,但是耗时较长。请根据不同的需要选择试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.长期不用可以-20℃保存。
2.试剂拆封后请尽快使用完!
2.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
检测方法
提取
适用样本
植物
产品应用
根据需要使用
仪器准备
离心机
振荡器
匀浆机/匀浆器
涡旋混匀器
移液器
冰箱
冰盒
振荡器
匀浆机/匀浆器
涡旋混匀器
移液器
冰箱
冰盒
试剂准备
PBS缓冲液 (pH7.4,实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液(1X)) (phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS:约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl)
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3. 一次性手套 4. 细胞筛(100um)
2.吸头
3. 一次性手套 4. 细胞筛(100um)
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
2.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
使用方法
1. 取新鲜植物样本叶片,洗净擦干后去除叶梗和粗脉。1g植物组织样本用手术剪刀尽可能剪碎。
2. 加入2ml提取液A后用匀浆机充分匀浆或者用Dounce匀浆器充分匀浆。
3. 将匀浆液用100um细胞筛过滤。
4. 在2000×g力条件下离心10分钟,弃沉淀,吸取上清。
5. 在3000×g力条件下离心10分钟,弃沉淀,吸取上清。
6. 将上清在11000×g离心20分钟,弃上清,收集沉淀。
7. 在沉淀中加入1ml提取液B,充分混匀。
8. 在11000×g离心20分钟,弃上清,收集沉淀。
9. 沉淀即为线粒体。
10. 用试剂C或合适的其他缓冲液悬浮线粒体,置冰箱备用或直接用于下游实验。
2. 加入2ml提取液A后用匀浆机充分匀浆或者用Dounce匀浆器充分匀浆。
3. 将匀浆液用100um细胞筛过滤。
4. 在2000×g力条件下离心10分钟,弃沉淀,吸取上清。
5. 在3000×g力条件下离心10分钟,弃沉淀,吸取上清。
6. 将上清在11000×g离心20分钟,弃上清,收集沉淀。
7. 在沉淀中加入1ml提取液B,充分混匀。
8. 在11000×g离心20分钟,弃上清,收集沉淀。
9. 沉淀即为线粒体。
10. 用试剂C或合适的其他缓冲液悬浮线粒体,置冰箱备用或直接用于下游实验。
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