叶绿体提取试剂盒

BB-3622
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产品概述 product description

叶绿体是植物细胞所特有的能量转换细胞器，光合作用就是在叶绿体中进行的, 由于具有这一重要功能，所以叶绿体一直是细胞生物学、遗传学和分子生物学的重要研究对象。 贝博® BBproExtra® 叶绿体提取试剂盒用简便快速的方法即可快速提取得到叶绿体。 本试剂盒适用于提取新鲜植物样本的叶绿体，用于冻存样本的提取时由于冻存过程中大部分叶绿体会被破坏，叶绿体回收率较低。 贝博® BBproExtra® 叶绿体提取试剂盒提取的叶绿体具有生物活性，可以用于叶绿体功能研究、叶绿体蛋白提取等各种下游应用。 本试剂盒采用非酶法的快速提取方法，可以在一小时内快速提取得到叶绿体，但是回收率比酶法叶绿体提取试剂盒稍低。需要酶法提取试剂盒可以联系贝博选择其他货号的试剂盒（相关产品BB-36222），酶法提取得到的叶绿体回收率会有增加，但是耗时较长。请根据不同的需要选择试剂盒。

保存温度
2-8℃
注意事项
1.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
检测方法
提取
适用样本
植物
产品应用
根据需要使用
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.匀浆机/匀浆器
4.涡旋混匀器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液 （pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液（1X）） （phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS：约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl）
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套 4.细胞筛
使用注意事项
1.离心机转速有相对离心力（RCF，×g）和每分钟转速（RPM）两种表示方式，有些离心机设置有RPM和×g显示切换，但部分离心机没有自动切换功能。需要用下面的公式进行换算：
g=r×1.118×10-5×rpm2 （r 为有效离心半径，即从离心机轴心到离心收集管底部中心位置的长度，单位为厘米) 例如: 转速为3000rpm，有效离心半径为10 cm，则相对离心力（RCF，×g）为=10×1.118×10-5×30002=1006.2（×g）。
使用方法
1. 取500mg-1g新鲜植物样本叶片，洗净擦干后去除叶梗和粗脉。用手术剪刀尽可能剪碎。
2. 加入2ml PBS用组织搅碎机/匀浆机/匀浆器充分匀浆。
3. 将匀浆用100 μm细胞筛过滤。
4. 将滤液在3000×g条件下离心10分钟，弃上清，收集沉淀。
5. 在沉淀中加入1ml提取液A，充分混匀。
6. 用匀浆机/匀浆器充分匀浆。
7. 在3000×g条件下离心10分钟，弃上清，收集沉淀。
8. 在沉淀中加入0.5ml提取液B，充分混匀。
9. 置振荡器振荡20分钟。
10. 在200×g力离心2分钟。弃沉淀，取上清。
11. 在1000×g力离心2分钟。弃沉淀，取上清。
12. 将上清3000×g力离心10分钟。
13. 弃上清，沉淀即为叶绿体。
14. 用400 μl叶绿体悬浮液或其他相应的缓冲液重悬叶绿体，置冰箱备用或直接用于下游实验。
参考文献
1.Mengyun Hu Xueqiang Zhao Qian Liu, et al.
Transgenic expression of plastidic glutamine synthetase increases nitrogen uptake and yield in wheat
Plant Biotechnology Journal 2018 （IF=6.305）

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