产品概述
product description
贝博® BBproExtra® 酵母原生质体制备试剂盒提供全套试剂,适用于从各种酵母样本制备原生质体。此试剂盒提供了一个系统,维持原生质体是分开和完整的。优化的试剂配方和程序可以快速分离原生质体,而绝少交叉污染。 本试剂盒提取的原生质体组分仍保持其生化功能,适合各种下游分析。 本试剂盒不适用冷冻酵母样本的原生质体制备。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对动物细胞、组织、植物、真菌、酵母、微生物、藻类、液体、土壤等各种不同样本的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对细胞膜、核、胞质、线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网、外泌体等细胞不同部位的蛋白提取试剂盒。 贝博® BBproExtra® 可以提供针对下游实验不同应用的试剂盒,例如用于Western Blotting和双向电泳等不同下游应用的试剂盒;含去垢剂成分和不含去污剂成分的蛋白提取试剂盒;专用于蛋白质谱检测、Pull-down实验的试剂盒等总计300多种蛋白提取试剂盒供选择使用。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.试剂B长期不用时-20℃储存。避免反复冻融。
2.可以根据需要分装后使用。
3.试剂拆封后请尽快使用完!
2.可以根据需要分装后使用。
3.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
检测方法
提取
适用样本
酵母
产品应用
根据需要使用
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液 (pH7.4,实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液(1X)) (phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS:约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl)
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
2.实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
使用方法
1. 酵母培养物,在4℃,5000×g条件下离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集酵母沉淀。
2. 用PBS洗涤酵母两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 每100 μl体积或100 mg湿重酵母沉淀物中加入400 μl酵母原生质体提取液A,混匀后,在30℃条件下保温15分钟。
4. 在2000×g条件下离心5-10分钟,收集酵母沉淀。
5. 用PBS缓冲液洗涤酵母一次,离心收集菌体。
6. 酵母沉淀物中加入500 μl酵母原生质体提取液B,充分混匀。
7. 在37℃或室温条件下轻微振荡60分钟-2小时。
8. 在2000×g条件下离心5-10分钟,弃上清,收集沉淀。
9. 沉淀用PBS缓冲液洗涤一次。
10. 离心收集沉淀,即得到酵母原生质体样品。
11. 将酵母原生质体样本用试剂C重悬。
12. 置冰箱备用或直接用于下游实验。
2. 用PBS洗涤酵母两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
3. 每100 μl体积或100 mg湿重酵母沉淀物中加入400 μl酵母原生质体提取液A,混匀后,在30℃条件下保温15分钟。
4. 在2000×g条件下离心5-10分钟,收集酵母沉淀。
5. 用PBS缓冲液洗涤酵母一次,离心收集菌体。
6. 酵母沉淀物中加入500 μl酵母原生质体提取液B,充分混匀。
7. 在37℃或室温条件下轻微振荡60分钟-2小时。
8. 在2000×g条件下离心5-10分钟,弃上清,收集沉淀。
9. 沉淀用PBS缓冲液洗涤一次。
10. 离心收集沉淀,即得到酵母原生质体样品。
11. 将酵母原生质体样本用试剂C重悬。
12. 置冰箱备用或直接用于下游实验。
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