细胞活性检测试剂盒-绿色荧光

BB-4220
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产品概述 product description

贝博TM BBcellProbeTM 绿色荧光细胞活性检测试剂盒是采用BBcellProbeTM C01细胞活性探针检测细胞活性的试剂盒。BBcellProbeTM C01细胞活性探针是一种可以对活细胞进行荧光标记的细胞活性染色试剂,当C01荧光探针其进入到细胞质后,酯酶会将其水解并留在细胞内,发出强绿色荧光,荧光强度与活细胞数量成正比。 BBcellProbeTM C01细胞活性探针是一种性合成的绿色荧光探针,其本身荧光极低,进入活性细胞并被活细胞的酯酶剪切生成强绿色荧光的产物。绿色荧光产物的的激发和发射波长分别为488nm和520nm。C01细胞活性探针的细胞毒性很低,不会抑制任何的细胞功能如增殖。使用C01细胞活性探针的活性检测的实验结果与标准的51Cr-释放法所得结果相一致。 贝博可以为您提供各种BBcellProbeTM N系列、L系列、E系列、G系列和BBcellProbeTM M系列细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网等细胞亚结构荧光染色试剂盒,以及钙离子、钠离子、神经细胞等各种荧光染色试剂盒产品。

保存温度
2-8℃避光
注意事项
1.C01探针-20℃防潮避光保存;
2.探针稀释液2-8℃保存。
3.探针稀释液长期不用可以-20℃保存。
有效期
一年
检测方法
1.流式细胞仪
2.激光共聚焦
3.荧光显微镜
适用样本
1.悬浮细胞
2.贴壁细胞
产品特点
1.使用方便:仅使用单一试剂;
2.快速;
3.灵敏度高,数据可靠,重现性好,线性范围更宽;
4.结果稳定:试剂本身稳定性高,实验结果稳定可靠;
5.无需放射性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低;
6.适合于高通量药物筛选。
产品应用
1.流式细胞仪
2.激光共聚焦
3.荧光显微镜
仪器准备
1.荧光酶标仪或流式细胞仪或荧光显微镜或激光共聚焦
2.CO2培养箱
3.离心机
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.PBS 2.HBSS
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套

使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
2.BBcellProbeTM C01细胞活性探针为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3.BBcellProbeTM C01细胞活性探针对湿度非常敏感,若是BBcellProbeTM C01细胞活性探针溶液每次取完需要量后,必须紧紧密封盖子。建议根据单次用量,分装密封保存。不可使用含水的吸头。
4.由于BBcellProbeTM C01细胞活性探针的稳定性比较差,染色工作液必须现配现用,并且在当天用完。
5.BBcellProbeTM C01细胞活性探针母液请拧紧螺旋盖,避免受潮失效。
6.接种时注意细胞悬液一定要混匀,以避免细胞沉淀下来,导致每孔中的细胞数量不等,可以每接种几个孔就混匀一下。培养板周围一圈孔培养基容易挥发,为了减少误差,建议培养板的四边每孔只加培养基,而不作为指标检测孔。
7.建议使用黑壁96孔板。
8.不同细胞染色浓度和时间不同,建议做预实验摸索最佳染色浓度和时间,采用最低染色浓度。
使用方法
细胞样本处理
仅供参考,以实际为准!
1、收集细胞,加细胞悬液100ul(约5000-10000个细胞)到96孔板(边缘孔用无菌水或PBS填充)。每板设对照(加100l培养基)。
  2、置37℃,5% CO2孵育过夜,倒置显微镜下观察。
3、每孔加入10 ul 待检测药物溶液,37℃孵育。
4、到待测时间点进行细胞活性检测。

活性检测
1、 染色工作液的配制:
从冰箱中取出荧光染色试剂,室温溶解后混匀。
根据样品数按下列比例配制染色工作液。
用37℃培养箱预热染料稀释液试剂B将BBcellProbeTM C01荧光染料10倍稀释。再用相应的其他缓冲液(如HBSS)或无血清培养基将探针C01进行50-100倍稀释,配制成染色工作液。
2、 离心细胞,弃培养基,用PBS洗涤细胞2-3次,离心,弃PBS。
3、 每孔加入100ul染色工作液,37℃避光孵育15-30分钟。
4、 用PBS洗涤细胞2次。
5、 加入100ul HBSS或无血清培养基。
6、 用荧光酶标仪/显微镜/流式细胞仪检测结果。最大激发波长488nm,最大发射波长分别为520nm。

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