胰蛋白酶溶液(0.25%，不含EDTA)

BB-43016
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产品概述 product description

胰蛋白酶(Trypsin)是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到小肠后，小肠内的肠肽酶会活化该酶原，形成胰蛋白酶，能够继续活化更多胰蛋白酶原，这种过程即自动催化。胰蛋白酶在小肠工作，它会将蛋白质水解为肽，进而分解为氨基酸，其最适温度约为37℃。 贝博® 胰蛋白酶溶液（0.25%）主要由0.25%胰酶组成，不含EDTA，经过滤除菌。 本试剂可以直接用于培养细胞的消化，或者一些组织的消化，通常室温下1min左右就可以消化下大多数贴壁细胞。 贝博® BBcellProbe® 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。

保存温度
-20℃保存
注意事项
1、长期存放请分装后-20℃保存。
2、避免反复冻融。
3、冻存后溶解时注意重新混匀。
有效期
一年
仪器准备
1. 细胞培养设备
2. 离心机
3. 移液器
4. 冰箱
5. 冰盒
试剂准备
1.PBS 缓冲液 或者HBSS
耗材准备
1.离心管
2.吸头
使用注意事项
1.尽量减少反复冻融的次数，以免失效。
2.在使用胰蛋白酶溶液的过程中，要特别注意避免胰蛋白酶溶液被细菌污染。
3.胰蛋白酶溶液消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。
4.以下步骤仅供参考，以实际使用习惯为准。
使用方法
1. 贴壁细胞的消化：
（1） 吸除培养液，用无菌PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
（2） 加入少量胰蛋白酶溶液，略盖过细胞即可。室温放置0.5～2min，不同的细胞消化时间有所不同。
（3） 显微镜观察，如果细胞明显收缩并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪头吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来，吸除胰蛋白酶溶液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
（4） 如果发现消化不足，则再加入胰蛋白酶溶液重新消化。
（5） 如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰蛋白酶溶液把细胞全部吹打下来。1000～2000g离心1min，沉淀细胞，尽量去除胰蛋白酶溶液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。

2. 组织的消化：
不同的组织需要消化的时间差异很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。

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