细胞冻存液（无血清）

BB-43061
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产品概述 product description

随着实验室细胞培养的发展，除了原代培养之外，人工开发出来的细胞系的保存越来越重要。冷冻保存细胞系的优点如下：1、减少基因漂移；2、减缓细胞系的衰老；3、稳定表型；4、减少微生物污染及交叉污染机会等。细胞冷冻的原理在于尽可能降低细胞内的晶体形成，减少细胞内水凝固所形成的高浓度溶质对细胞造成的低温损伤，从提高细胞复苏时的存活率。细胞冻存的数量应保证复苏时低温保护剂获得1:10～1:20的稀释，稀释后的细胞浓度扔高于正常传代的细胞浓度为宜，这是因为当低温保护剂稀释10～20倍以后，该浓度一般不会对细胞造成毒性损伤。 贝博® 细胞冻存液（无血清）主要由培养基、冷冻保护剂等组成，不含血清，是一种经典的无菌冻存液。用于各种哺乳动物原代细胞、传代细胞系、杂交瘤细胞等的冻存。 贝博® 细胞冻存液（无血清）采用特别配方，成分明确，无批次间差异，可以有效提高细胞冻存活率和复苏活力。本冻存液不含动物来源性蛋白，能减少各类病毒、霉菌和支原体等的污染，确保冻存细胞安全，既适用于一般培养细胞的冻存，也适用于无血清培养细胞和蛋白表达细胞的冻存。 本冻存液是即用型试剂，无需现配，即开即用。可以无需程序降温，可直接放置-80℃冻存，操作简单，无需液氮，置于-80℃冰箱可稳定冻存长达5年。本冻存液可微量、原位冻存，例如杂交瘤细胞的冻存，省时高效。

保存温度
-20℃保存
注意事项
注意微生物污染
有效期
一年
仪器准备
1. 细胞计数器
2. 超低温冰箱或液氮
3. 超净工作台
耗材准备
1. 一次性手套
2. 细胞冻存管
使用注意事项
1. 注意在超净工作台内无菌操作，尽量避免污染；
2. 初次使用融化后可在4℃保存1个月，但应减少反复冻融的次数，以免失效；
3. 杂交瘤细胞冻存时应定期复苏，检查细胞的活性和分泌抗体的稳定性；
使用方法
1. 培养细胞至对数生长晚期，显微镜观察其外观、形态、有无污染等，取状态良好的细胞进行冻存操作。如为贴壁生长细胞，用胰蛋白酶消化并用完全培养基终止消化，进行细胞计数；如为悬浮生长细胞，进行细胞计数。
2. 500~1000g离心5min，弃上清。
3. 加入适量的细胞冻存液（无血清），重悬细胞，使细胞浓度达到1~10x106/ml，置于冻存管中，密闭，不要拧得太紧，避免弯曲变形。
4. 一般遵循1℃/min的速率进行冷冻。亦可采用4℃ 20min, -20℃ 30min,-70℃ 过夜,最后置于液氮罐中长期存储。

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