bestbio@163.com
服务热线：021-33921235
登录
说明书下载
保存温度
2-8℃
注意事项
1.试剂瓶开盖后各组份按要求条件保存。
2.试剂拆封后请尽快使用完！
2.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
适用样本
动物脑组织
仪器准备
1.高速冷冻离心机；
2.超速离心机；
3.振荡器；
4.Dounce匀浆器；
5.涡旋混匀器；
6.移液器；
7.冰箱；
8.冰盒
2.超速离心机；
3.振荡器；
4.Dounce匀浆器；
5.涡旋混匀器；
6.移液器；
7.冰箱；
8.冰盒
试剂准备
PBS缓冲液
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2.实验过程中的所有试剂须预冷所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3.以下步骤以大鼠大脑皮层为例，每样约200mg组织。实际使用时可以等比例调整。
2.实验过程中的所有试剂须预冷所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3.以下步骤以大鼠大脑皮层为例，每样约200mg组织。实际使用时可以等比例调整。
使用方法
1.大鼠颈椎脱白处死，快速取200mg新鲜大鼠大脑皮层组织（或海马），用预冷的
PBS洗涤干净，去除血迹和结缔组织。
2.用手术剪刀或刀片尽可能剪碎，用冷PBS洗涤两次。
3.沉淀中加入1ml冷的提取液试剂A混匀，置冰上5分钟。转移至预冷的玻璃匀浆
器中。
4.用 Dounce 匀浆器匀浆。
5.收集匀浆液，在4℃，600×g条件下离心10分钟。弃沉淀，收集上清。
6.将上清在4C，12,000-15,000×g力条件下离心20分钟。弃上清，收集沉淀。
7.在沉淀中加入400μ冷的提取液试剂B，轻轻混匀。
8.在4°C，12,000×g力条件下离心15分钟。弃上清，留沉淀。
9.用1mL提取液C重悬沉淀，备用。
10.在超速离心管中依次加入2mL提取液D3→2mL提取液D2→2mL提取液D1。
11将提取液C重悬液缓慢铺在提取液D的顶层。
12.超速离心，100000xg条件，4℃离心2小时。
13.离心后，提取液D3和D2界面层处的白色浑浊带为突触后膜富集层。
14.小心移除上面的各层液体，收集D3和D2界面层处的白色浑浊带（约1.5-2mL)，
转移至新的15mL离心管中。
15.向收集的突触后膜组分中加入5倍体积的预冷纯水，轻轻颠倒混匀。
16.在15,000×g，4℃离心30分钟，弃上清，沉淀即为突触后膜。
PBS洗涤干净，去除血迹和结缔组织。
2.用手术剪刀或刀片尽可能剪碎，用冷PBS洗涤两次。
3.沉淀中加入1ml冷的提取液试剂A混匀，置冰上5分钟。转移至预冷的玻璃匀浆
器中。
4.用 Dounce 匀浆器匀浆。
5.收集匀浆液，在4℃，600×g条件下离心10分钟。弃沉淀，收集上清。
6.将上清在4C，12,000-15,000×g力条件下离心20分钟。弃上清，收集沉淀。
7.在沉淀中加入400μ冷的提取液试剂B，轻轻混匀。
8.在4°C，12,000×g力条件下离心15分钟。弃上清，留沉淀。
9.用1mL提取液C重悬沉淀，备用。
10.在超速离心管中依次加入2mL提取液D3→2mL提取液D2→2mL提取液D1。
11将提取液C重悬液缓慢铺在提取液D的顶层。
12.超速离心，100000xg条件，4℃离心2小时。
13.离心后，提取液D3和D2界面层处的白色浑浊带为突触后膜富集层。
14.小心移除上面的各层液体，收集D3和D2界面层处的白色浑浊带（约1.5-2mL)，
转移至新的15mL离心管中。
15.向收集的突触后膜组分中加入5倍体积的预冷纯水，轻轻颠倒混匀。
16.在15,000×g，4℃离心30分钟，弃上清，沉淀即为突触后膜。
常见问题分析
1.突触后膜如何鉴定？
WB检测标志物，突触后膜Marker：PSD-95.
2.样品如何保存？
保存：短期（1周）4°C冷藏：长期（数月）分装后-80℃C冻存，避免反复冻融（可加入50%甘油提高稳定性）。
WB检测标志物，突触后膜Marker：PSD-95.
2.样品如何保存？
保存：短期（1周）4°C冷藏：长期（数月）分装后-80℃C冻存，避免反复冻融（可加入50%甘油提高稳定性）。
-
优惠促销Promotion
-
轻松下单Order
-
在线留言Online message
-
帮助中心Help center