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保存温度
2~8℃
注意事项
1.试剂瓶开盖后各组份按要求条件保存。
2.拆封后请尽快使用完！
2.拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
检测方法
根据需要使用
适用样本
细胞
产品应用
根据需要使用
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4移液器
5.冰箱
6.冰盒
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
2.含血清的完全培养基
2.含血清的完全培养基
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2.实验过程中的所有试剂须预冷：所有器具须放-20℃C冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3.常用大鼠肾上皮细胞（NRK）、小鼠成纤维细胞（L929）等易迁移、易产生迁移体的细胞系。
4.建议使用低传代数的健康细胞，状态要好。
2.实验过程中的所有试剂须预冷：所有器具须放-20℃C冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
3.常用大鼠肾上皮细胞（NRK）、小鼠成纤维细胞（L929）等易迁移、易产生迁移体的细胞系。
4.建议使用低传代数的健康细胞，状态要好。
使用方法
1.细胞培养与迁移体诱导。
2.小心收集细胞培养上清至一干净50ml离心管I。
3.加入适量37°C预热的试剂A，置37°C孵育2分钟。
4.加入与上述试剂A等体积的含血清培养基，轻柔吹打混匀，收集全部液体至以上第2步的50ml离心管I中合并。
5.将离心管I在4°C，1,000×g力条件下离心10分钟。弃沉淀，收集上清。
6.将上清在4°C，4,000×g力条件下离心20分钟。弃沉淀，收集上清。
7.将上清在4°C，20,000×g力条件下离心30-45分钟。弃上清，收集沉淀。
8.在沉淀中加入400μ冷的试剂B，充分混匀。
9.在4°C，20,000×g力条件下离心30分钟。弃上清，收集沉淀。
10.沉淀用迁移体保存液C重悬。
11.即得到迁移体样品，置冰箱保存备用或直接用于下游实验。
2.小心收集细胞培养上清至一干净50ml离心管I。
3.加入适量37°C预热的试剂A，置37°C孵育2分钟。
4.加入与上述试剂A等体积的含血清培养基，轻柔吹打混匀，收集全部液体至以上第2步的50ml离心管I中合并。
5.将离心管I在4°C，1,000×g力条件下离心10分钟。弃沉淀，收集上清。
6.将上清在4°C，4,000×g力条件下离心20分钟。弃沉淀，收集上清。
7.将上清在4°C，20,000×g力条件下离心30-45分钟。弃上清，收集沉淀。
8.在沉淀中加入400μ冷的试剂B，充分混匀。
9.在4°C，20,000×g力条件下离心30分钟。弃上清，收集沉淀。
10.沉淀用迁移体保存液C重悬。
11.即得到迁移体样品，置冰箱保存备用或直接用于下游实验。
常见问题分析
1.迁移体鉴定方法?
迁移体常用以下方法鉴定
形态鉴定：
透射电镜（TEM）
光学/荧光显微镜
生化鉴定：
免疫印迹（Westem Blot)
·粒径分析（NTA)
2.迁移体产量低？
通常是细胞迁移能力差，需要优化培养条件（如添加趋化因子）。
选择高迁移能力的细胞系。
确保细胞状态良好，处于活跃迁移期。
迁移体常用以下方法鉴定
形态鉴定：
透射电镜（TEM）
光学/荧光显微镜
生化鉴定：
免疫印迹（Westem Blot)
·粒径分析（NTA)
2.迁移体产量低？
通常是细胞迁移能力差，需要优化培养条件（如添加趋化因子）。
选择高迁移能力的细胞系。
确保细胞状态良好，处于活跃迁移期。
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