2-8℃或室温避光保存。

1.试剂拆封后请尽快使用完！
2.试剂须避免冷冻；避免过热，不要超过25℃

6个月

荧光显微镜/激光共聚焦

真菌/酵母/微孢子虫/细菌等

荧光显微镜/激光共聚焦

1.荧光显微镜/激光共聚焦
2.培养箱
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒

1.乙醇
2.甲醇
3.二甲苯
4.培养基

1.载玻片
2.盖玻片
3.一次性手套
4.铝箔

1.预实验很重要。必须要做预实验，在正式实验之前取少量样本优化实验条件，并像正式样本一样认真进行，看实验结果是否可行，实验条件是否适合自己的样本。由于生物样本的多样性，不同样本的实验条件通常差异较大，同种细胞的不同模型下需要的实验条件也可能不同，为了避免浪费正式样本和试剂，一定要提前预实验优化实验条件。
2.Calcofluor white是一种荧光增白剂，有助于通过形态学来检测某些微生物。最终鉴定可能需要额外的生化和血清学检测，或通过其他染色技术进行确认。
3.研究表明，隐球菌的荚膜不会被钙氟白色污染。建议使用替代技术，如使用印度墨水进行直接检查，以检测这种生物体。
4.各种类型的碎屑可能会发出荧光。细菌也可能发出荧光，但不如真菌明亮。
5.卡氏肺孢子虫、棘阿米巴和微孢子虫必须同时加入试剂A和B，以充分发出荧光，单用试剂B可能染色效果较差。
6.增亮剂诱导的荧光随着观看时间的延长而减弱，尤其是在较薄的切片中，但荧光可以通过重新染色来恢复。
7.如果标本中含有过多的非特异性碎屑或酵母，则应通过另一种染色方法进行微孢子虫的进一步检查。所有微孢子虫阳性均应通过改良三色染色法进行确认。

真菌和酵母：
1. 将待测样品加在干净的载玻片上。
2. 加入1滴试剂A，轻轻晃动。
3. 加入1滴试剂B并混合均匀。
4. 用干净的玻璃盖玻片盖住，然后用荧光显微镜，观察荧光和典型形态学观察。
微孢子虫：
1. 将样品（10 μl）放在干净的载玻片上并在60℃加热固定，加热至干燥。常见新鲜的或固定保存的（福尔马林或SAF）粪便标本，其他标本（如组织、十二指肠吸出物、浓缩尿液、痰液、CSF、鼻腔分泌物、BAL和结膜）均可。
2. 将载玻片在甲醇中固定2分钟。
3. 加入1滴试剂A，轻轻搅拌。
4. 加入1滴试剂B并混合均匀。
5. 染色一分钟，然后用清水冲洗去除多余的染液。用干净的盖玻片盖住样品并使用荧光显微镜观察样品。观察荧光和典型形态。
卡氏肺孢子虫（Pneumocystis carinii）：
1. 将样品放在干净的载玻片上，风干。选择的样品是浓缩液体痰液等（10-25 μl）或组织样本。
2. 将载玻片在甲醇中固定2分钟。
3. 加入1滴试剂A，轻轻搅拌。
4. 加入1滴试剂B并混合。
5. 染色一分钟。然后用清水冲洗去除多余的染液。用干净的盖玻片盖住样品并使用荧光显微镜观察样品。观察荧光和典型形态。
Acanthamoeba cysts：
1. 将试样放在干净的载玻片上，并风干。合适的标本包括：角膜刮片或活检，结膜或角膜溃疡、隐形眼镜用具，以及至少100 ml液体的浓缩样品。
2. 将载玻片在甲醇中固定2分钟。
3. 也可以使用石蜡切片（6 μm厚）。
a. 将玻片在二甲苯替代品中浸泡1-2分钟以去除石蜡。
b. 将切片在100%酒精中浸泡12次。
c. 将切片在95%乙醇中浸泡12次。
d. 在纯水中轻轻冲洗，并将玻片沥干。
4. 加入1滴试剂A，轻轻搅拌。
5. 加入1滴试剂B并混合。
6. 染色五分钟。通过冲洗去除多余染色液。用干净的盖玻片盖住样品并使用荧光显微镜观察样品。观察荧光和典型形态。
结果解读：
真菌元素，酵母
典型形态的亮苹果绿荧光
微孢子虫-
苹果绿荧光，肠道微孢子虫孢子大小在0.9-1.5 μm至1.2-2.0 μm之间，细胞壁变亮，但染色不特异。
卡氏肺孢子虫-
明亮的苹果绿荧光，包囊直径5-8 μm，包含多达8个新月形或多形性孢子，包囊内的细胞壁和双括号结构染色强烈。
棘阿米巴囊肿-
囊泡（10-25 μm）呈波纹状，双壁，有明亮的苹果绿色荧光和明亮的橙色细胞质。
细菌
弱到无荧光，典型的球状或细菌状
质量控制：
贝博CFW的所有批号均已使用以下质量控制生物体进行了测试，结果均合格。
对照生物的测试应按照既定的实验室质量控制程序进行。如果发现异常质量控制结果，则不应报告结果。