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产品概述
product description
结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维：胶原纤维、网状纤维、弹力纤维，而胶原纤维（collagen fiber）是分布最广、含量最多的一种纤维。Masson三色染色又称为马松染色，是结缔组织染色总最经典的一种方法，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松、渗透性高的组织。然而、淡绿或苯胺蓝的分子量都很大，因此Masson染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈绿色（淡绿）或蓝色（苯胺蓝），主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 贝博®改良Masson三色染色与常规Masson三色染色的区别在于采用天青石蓝苏木素淡染细胞核。其特点在于分化时间短（1~2min）；色彩清晰鲜艳，适用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色；所染切片保存时间长且不易褪色。胶原纤维呈蓝色，肌纤维、胞质、纤维素、角蛋白和红细胞呈红色、胞核呈蓝褐色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。 贝博® BBcellProbe® 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。
保存温度
2-8℃避光
注意事项
1.有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。
2.试剂拆封后请尽快使用完！
2.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
一年
检测方法
显微镜
仪器准备
1. 37℃温箱
2. 移液器
3. 冰箱
4. 冰盒
2. 移液器
3. 冰箱
4. 冰盒
试剂准备
1. 10%福尔马林固定液
2. 蒸馏水
3. 系列乙醇
2. 蒸馏水
3. 系列乙醇
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1. 切片脱蜡应尽量干净。
2. 酸性乙醇的分化时间应根据切片薄厚，组织的类别和新旧而定。
3. 磷钼酸的作用一方面是使染上红色的胶原纤维被分化成无色或淡红色，而肌纤维纤维素等仍呈先鲜红色；另一方面对胶原纤维又起媒染作用，使胶原纤维与苯胺蓝液较易结合。
4. 苯胺蓝液染色后用弱酸溶液处理，目的是除去原浆内的蓝色，使染色鲜艳和清晰。如Zenker液固定的组织，弱酸溶液处理可延长至5分钟。
5. 弱酸溶液可使色彩更清晰鲜艳，如使用量大可自行配制0.1-0.3%乙酸溶液予以替代。
2. 酸性乙醇的分化时间应根据切片薄厚，组织的类别和新旧而定。
3. 磷钼酸的作用一方面是使染上红色的胶原纤维被分化成无色或淡红色，而肌纤维纤维素等仍呈先鲜红色；另一方面对胶原纤维又起媒染作用，使胶原纤维与苯胺蓝液较易结合。
4. 苯胺蓝液染色后用弱酸溶液处理，目的是除去原浆内的蓝色，使染色鲜艳和清晰。如Zenker液固定的组织，弱酸溶液处理可延长至5分钟。
5. 弱酸溶液可使色彩更清晰鲜艳，如使用量大可自行配制0.1-0.3%乙酸溶液予以替代。
使用方法
操作步骤（仅供参考）
1. 组织固定于10%福尔马林固定液，常规脱水包埋。切片厚4um，常规脱蜡至水；
2. 切片入试剂A，37℃温箱内2小时进行媒染或室温过夜。
3. 流水冲洗至黄色消失。
4. 试剂B染色2-3分钟，水洗。
5. 试剂C染色2-3分钟，水洗。
6. 试剂D分化数秒，流水冲洗10分钟。
7. 试剂E染色10分钟，蒸馏水冲洗。
8. 试剂F磷钼酸溶液处理10分钟。
9. 倾去试剂F，不用水洗，直接滴加试剂G苯胺蓝染色5分钟。
10. 试剂H弱酸处理2分钟。
11. 95%乙醇快速脱水，无水乙醇脱水3次，每次5-10秒。
12. 二甲苯透明3次，每次1-2分钟。
13. 中性树胶封片。
14. 结果观察。
结果：
胶原纤维： 蓝色；
肌纤维、胞浆、纤维素、红细胞、角蛋白： 红色；
细胞胞核： 蓝褐色。
1. 组织固定于10%福尔马林固定液，常规脱水包埋。切片厚4um，常规脱蜡至水；
2. 切片入试剂A，37℃温箱内2小时进行媒染或室温过夜。
3. 流水冲洗至黄色消失。
4. 试剂B染色2-3分钟，水洗。
5. 试剂C染色2-3分钟，水洗。
6. 试剂D分化数秒，流水冲洗10分钟。
7. 试剂E染色10分钟，蒸馏水冲洗。
8. 试剂F磷钼酸溶液处理10分钟。
9. 倾去试剂F，不用水洗，直接滴加试剂G苯胺蓝染色5分钟。
10. 试剂H弱酸处理2分钟。
11. 95%乙醇快速脱水，无水乙醇脱水3次，每次5-10秒。
12. 二甲苯透明3次，每次1-2分钟。
13. 中性树胶封片。
14. 结果观察。
结果：
胶原纤维： 蓝色；
肌纤维、胞浆、纤维素、红细胞、角蛋白： 红色；
细胞胞核： 蓝褐色。
参考文献
1. Yuyan Lu, et al.
Valsartan attenuates pulmonary hypertension via suppression of mitogen activated protein kinase signaling and matrix metalloproteinase expression in rodents
Molecular Medicine Reports 2017
2. Fei Hou, et al.
Attenuation of liver fibrosis by herbal compound 861 via upregulation of BMP-7/Smad signaling in the bile duct ligation model rat
Molecular Medicine Reports 2016
3. Huikuan Gao, et al.
Sequential changes in autophagy in diabetic cardiac fibrosis
Molecular Medicine Reports 2015
Valsartan attenuates pulmonary hypertension via suppression of mitogen activated protein kinase signaling and matrix metalloproteinase expression in rodents
Molecular Medicine Reports 2017
2. Fei Hou, et al.
Attenuation of liver fibrosis by herbal compound 861 via upregulation of BMP-7/Smad signaling in the bile duct ligation model rat
Molecular Medicine Reports 2016
3. Huikuan Gao, et al.
Sequential changes in autophagy in diabetic cardiac fibrosis
Molecular Medicine Reports 2015
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