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产品概述
product description
贝博® BBcellProbe® 钙盐染色试剂盒采用茜素红S法，茜素红S属一种蒽醌类衍生物，是茜素磺酸钠盐，它能与碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物。茜素红S往往对少量的沉积物可得到更可靠的结果。主要适用于动物原生代或培养细胞的钙沉积和钙化结节检测。广泛用于骨细胞或组织病理生理的研究。 钙在人体内大量存在，构成骨骼作为支持人体的支架，在分泌、运送、肌肉收缩、神经传导等也起重要作用。除骨骼和牙齿外，正常时钙渗透在所有组织和细胞中，一般不以固体状态出现在组织内。但在某些情况下，钙析出成固体并沉着于组织内，则为病理性钙盐沉着。沉着的钙盐主要是磷酸钙，其次为碳酸钙。 贝博® BBcellProbe® 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。
保存温度
室温避光
注意事项
1.有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。
2.试剂拆封后请尽快使用完！
2.试剂拆封后请尽快使用完！
有效期
6个月
检测方法
显微镜
适用样本
1. 切片
2. 细胞
2. 细胞
仪器准备
1. 显微镜
2. 移液器
3. 冰箱4. 冰盒
2. 移液器
3. 冰箱4. 冰盒
试剂准备
1. 固定液：10%中性福尔马林/乙醇福尔马林/乙醇
2. 70%乙醇和95%乙醇。如需脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯，中性树胶或其它封片剂。如样品是石蜡切片，需自备90%乙醇，无水乙醇以及二甲苯。
2. 70%乙醇和95%乙醇。如需脱水、透明和封片处理，还需自备二甲苯，中性树胶或其它封片剂。如样品是石蜡切片，需自备90%乙醇，无水乙醇以及二甲苯。
耗材准备
1. 染色缸
2. 吸头
3. 一次性手套
2. 吸头
3. 一次性手套
使用注意事项
1. 第一次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。
2. 染色时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。
3. 组织样品固定以中性福尔马林为佳，不宜采用酸性固定液，10%福尔马林固定4-6小时进行脱水包埋。
4. 茜素红S染色时间要根据钙盐的含量来确定。可在显微镜下观察，见钙盐呈较深的橙红色即取出水洗，如染色时间过长，就出现弥散现象，一般1~2min即可。
5. 经过茜素红S染色液染色后，钙沉积物是双折射的。
6. 茜素红S法在辨别和检测少量钙时特别有用，如检查肾中的异常钙化(尿钙过多)。
7. 试剂溶液在样品表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满样品表面。
2. 染色时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。
3. 组织样品固定以中性福尔马林为佳，不宜采用酸性固定液，10%福尔马林固定4-6小时进行脱水包埋。
4. 茜素红S染色时间要根据钙盐的含量来确定。可在显微镜下观察，见钙盐呈较深的橙红色即取出水洗，如染色时间过长，就出现弥散现象，一般1~2min即可。
5. 经过茜素红S染色液染色后，钙沉积物是双折射的。
6. 茜素红S法在辨别和检测少量钙时特别有用，如检查肾中的异常钙化(尿钙过多)。
7. 试剂溶液在样品表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满样品表面。
使用方法
切片样本：
1. 组织固定于10%中性福尔马林，常规脱水包埋。
2. 切片厚度5μm，常规脱蜡至水。
3. 蒸馏水洗1min。
4. 切片入茜素红S溶液染色1-5分钟。
5. 蒸馏水洗1分钟。
6. 入固绿染色液染色1分钟。
7. 蒸馏水洗3次。
8. 常规脱水透明，中性树胶封固。
细胞样本：
1. 细胞固定。
2. 用PBS洗涤2次。
3. 蒸馏水洗1分钟。
4. 浸入试剂A中，染色1-5分钟。
5. 蒸馏水洗1分钟。
6. 浸入试剂B浸泡1分钟。
7. 蒸馏水洗1分钟。
8. 常规脱水透明，中性树胶封固。
染色结果：
钙盐 橙红色
背景 绿色
1. 组织固定于10%中性福尔马林，常规脱水包埋。
2. 切片厚度5μm，常规脱蜡至水。
3. 蒸馏水洗1min。
4. 切片入茜素红S溶液染色1-5分钟。
5. 蒸馏水洗1分钟。
6. 入固绿染色液染色1分钟。
7. 蒸馏水洗3次。
8. 常规脱水透明，中性树胶封固。
细胞样本：
1. 细胞固定。
2. 用PBS洗涤2次。
3. 蒸馏水洗1分钟。
4. 浸入试剂A中，染色1-5分钟。
5. 蒸馏水洗1分钟。
6. 浸入试剂B浸泡1分钟。
7. 蒸馏水洗1分钟。
8. 常规脱水透明，中性树胶封固。
染色结果：
钙盐 橙红色
背景 绿色
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