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保存温度
-20℃
注意事项
1.染料短期2周内可以 2-8℃℃保存。染料长期不用可以-20℃℃保存。避免反复冻融
2.染色液 A 为 DMSO 溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需
要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
2.染色液 A 为 DMSO 溶液，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需
要加热融解，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
有效期
6个月
检测方法
激光共聚焦/荧光显微镜/流式细胞仪/荧光酶标仪
适用样本
革兰氏阴性细菌/阳性细菌
仪器准备
1.激光共聚焦/荧光显微镜/流式细胞仪/荧光酶标仪
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
PBS缓冲液 或 生理盐水
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
4.荧光检测专用的黑色96孔板
2.吸头
3.一次性手套
4.荧光检测专用的黑色96孔板
使用注意事项
1.BBcellProbe”C61 探针工作液含水，配制后不可以长期保存，须现配现用。
2.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
3.标记的条件因细菌细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请
先根据不同的实验要求、细菌类型、细菌的壁/膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅
供参考。
4.染色后立即进行分析。
2.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
3.标记的条件因细菌细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请
先根据不同的实验要求、细菌类型、细菌的壁/膜通透性等进行优化，确定最佳条件。以下方法仅
供参考。
4.染色后立即进行分析。
使用方法
C61探针工作液配制:
根据样本数量，用纯水将探针稀释液 B进行 10倍稀释。
2根据样本数量，用 10 倍稀释过的探针稀释液 B将探针进行 1000 倍稀释。即配成染色工作液。
C61 探针标记:
1.准备1ml新鲜待测菌液。
2.将待测细菌样本离心收集菌体。
3.用 PBS 洗涤菌体 2-3 次。离心收集菌体沉淀。
4.用染色工作液重悬菌体。
5.在 37避光孵育 30-60 分钟。
6.孵育结束后，离心收集菌体。
7.用 PBS 清洗细胞一次。离心收集菌体。
8.用 PBS 重悬菌体。充分混匀。
结果检测:
激光共聚焦:
在荧光显微镜(含合适滤片)下观察细胞。
最大激发/发射波长为 502 nm/526 nm。
酶标仪:
取 200 μl 加入荧光检测用黑色 96 孔板。
置于酶标仪中，后于激发波长为 502 nm、发射波长 526 nm 检测荧光强度
根据样本数量，用纯水将探针稀释液 B进行 10倍稀释。
2根据样本数量，用 10 倍稀释过的探针稀释液 B将探针进行 1000 倍稀释。即配成染色工作液。
C61 探针标记:
1.准备1ml新鲜待测菌液。
2.将待测细菌样本离心收集菌体。
3.用 PBS 洗涤菌体 2-3 次。离心收集菌体沉淀。
4.用染色工作液重悬菌体。
5.在 37避光孵育 30-60 分钟。
6.孵育结束后，离心收集菌体。
7.用 PBS 清洗细胞一次。离心收集菌体。
8.用 PBS 重悬菌体。充分混匀。
结果检测:
激光共聚焦:
在荧光显微镜(含合适滤片)下观察细胞。
最大激发/发射波长为 502 nm/526 nm。
酶标仪:
取 200 μl 加入荧光检测用黑色 96 孔板。
置于酶标仪中，后于激发波长为 502 nm、发射波长 526 nm 检测荧光强度
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