

产品概述
product description
贝博® BBcellProbe® O07线粒体ROS检测试剂盒是利用贝博® BBcellProbe® O07系列探针进行纯化线粒体ROS检测的试剂盒。本试剂盒中的BBcellProbe® O07线粒体ROS染色探针为绿色荧光标记的线粒体探针,具有506 nm / 526 nm的最大激发/发射波长。
贝博® BBcellProbe® O07线粒体ROS染色探针是一种膜渗透型的ROS荧光染料,只需简单孵育线粒体,即可穿过线粒体膜并直接聚集在活性线粒体上。一旦进入线粒体后,快速被ROS氧化,并产生绿色荧光。
不同于一般的酯化ROS探针,O07 ROS探针不需要依赖细胞胞质的酶活反应脱酯,可以直接穿透线粒体膜并跟线粒体内的活性氧反应生成荧光物质,荧光强度的大小反映线粒体内ROS的多少。
贝博® BBcellProbe® 系列线粒体探针具有多种颜色可以选择,可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的绿色荧光探针,贝博还可以提供红色、蓝色、橙色等颜色的染色试剂盒。
按每个样用200 μl染料计,试剂盒可以做100个样或200个样;按每个样用100 μl染料计,试剂盒可以做200个样或400个样。
保存温度
-20℃避光保存
注意事项
1. 染料长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。
2. 染色液A为DMSO溶液,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3. 可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
2. 染色液A为DMSO溶液,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3. 可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
有效期
6个月
检测方法
1. 荧光酶标仪
2. 荧光光度计
2. 荧光光度计
适用样本
纯化线粒体
仪器准备
1. 荧光分光光度计/酶标仪
2. 离心机
3. 移液器
4. 冰箱
5. 冰盒
2. 离心机
3. 移液器
4. 冰箱
5. 冰盒
试剂准备
1. PBS缓冲液 或者HBSS
耗材准备
1. 离心管
2. 吸头
3. 一次性手套
4. 荧光专用黑色96孔板
2. 吸头
3. 一次性手套
4. 荧光专用黑色96孔板
使用注意事项
1. O07染色液为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
2. 使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
3. 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
4. 标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根据不同的实验要求、细胞类型、膜通透性等进行优化,确定最佳条件。以下方法仅供参考。
5. 染色后立即进行分析。
6. 荧光酶标仪检测必须使用荧光检测专用的黑色96孔板。
2. 使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
3. 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
4. 标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根据不同的实验要求、细胞类型、膜通透性等进行优化,确定最佳条件。以下方法仅供参考。
5. 染色后立即进行分析。
6. 荧光酶标仪检测必须使用荧光检测专用的黑色96孔板。
使用方法
染色工作液配制:
根据样本数量,用染料稀释液将BBcellProbe® O07荧光染料10倍稀释,再用PBS缓冲液或者其它等渗缓冲液20-40倍稀释,配制成染色工作液。
O07探针标记:
1. 准备新鲜待测线粒体。
2. 将线粒体样本用200 μl染色工作液重悬,充分混匀。
3. 在37℃避光孵育20-60分钟。
4. 孵育结束后,离心收集线粒体。
5. 用PBS清洗线粒体一次。离心收集线粒体。
6. 用200 μl PBS重悬线粒体。充分混匀。
7. 加入荧光检测用黑色96孔板。
8. 置于酶标仪中,后于激发波长为488 nm、发射波长526 nm检测荧光强度。
结果处理:
荧光强度强表示线粒体活性氧强度高。
根据样本数量,用染料稀释液将BBcellProbe® O07荧光染料10倍稀释,再用PBS缓冲液或者其它等渗缓冲液20-40倍稀释,配制成染色工作液。
O07探针标记:
1. 准备新鲜待测线粒体。
2. 将线粒体样本用200 μl染色工作液重悬,充分混匀。
3. 在37℃避光孵育20-60分钟。
4. 孵育结束后,离心收集线粒体。
5. 用PBS清洗线粒体一次。离心收集线粒体。
6. 用200 μl PBS重悬线粒体。充分混匀。
7. 加入荧光检测用黑色96孔板。
8. 置于酶标仪中,后于激发波长为488 nm、发射波长526 nm检测荧光强度。
结果处理:
荧光强度强表示线粒体活性氧强度高。
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