纯化线粒体活性氧ROS检测试剂盒-绿色荧光

BB-460912
选择规格
  • 100T
  • 200T
价格
  • ¥1500元
  • ¥2600元
数量
产品概述 product description

贝博® BBcellProbe® O07线粒体ROS检测试剂盒是利用贝博® BBcellProbe® O07系列探针进行纯化线粒体ROS检测的试剂盒。本试剂盒中的BBcellProbe® O07线粒体ROS染色探针为绿色荧光标记的线粒体探针,具有506 nm / 526 nm的最大激发/发射波长。
贝博® BBcellProbe® O07线粒体ROS染色探针是一种膜渗透型的ROS荧光染料,只需简单孵育线粒体,即可穿过线粒体膜并直接聚集在活性线粒体上。一旦进入线粒体后,快速被ROS氧化,并产生绿色荧光。
不同于一般的酯化ROS探针,O07 ROS探针不需要依赖细胞胞质的酶活反应脱酯,可以直接穿透线粒体膜并跟线粒体内的活性氧反应生成荧光物质,荧光强度的大小反映线粒体内ROS的多少。
贝博® BBcellProbe® 系列线粒体探针具有多种颜色可以选择,可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的绿色荧光探针,贝博还可以提供红色、蓝色、橙色等颜色的染色试剂盒。
按每个样用200 μl染料计,试剂盒可以做100个样或200个样;按每个样用100 μl染料计,试剂盒可以做200个样或400个样。

保存温度
-20℃避光保存
注意事项
1. 染料长期不用可以-20℃保存。避免反复冻融。
2. 染色液A为DMSO溶液,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3. 可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
有效期
6个月
检测方法
1. 荧光酶标仪
2. 荧光光度计
适用样本
纯化线粒体
仪器准备
1. 荧光分光光度计/酶标仪
2. 离心机
3. 移液器
4. 冰箱
5. 冰盒
试剂准备
1. PBS缓冲液 或者HBSS
耗材准备
1. 离心管
2. 吸头
3. 一次性手套
4. 荧光专用黑色96孔板
使用注意事项
1. O07染色液为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
2. 使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
3. 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
4. 标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根据不同的实验要求、细胞类型、膜通透性等进行优化,确定最佳条件。以下方法仅供参考。
5. 染色后立即进行分析。
6. 荧光酶标仪检测必须使用荧光检测专用的黑色96孔板。
使用方法
染色工作液配制:
根据样本数量,用染料稀释液将BBcellProbe® O07荧光染料10倍稀释,再用PBS缓冲液或者其它等渗缓冲液20-40倍稀释,配制成染色工作液。

O07探针标记:
1. 准备新鲜待测线粒体。
2. 将线粒体样本用200 μl染色工作液重悬,充分混匀。
3. 在37℃避光孵育20-60分钟。
4. 孵育结束后,离心收集线粒体。
5. 用PBS清洗线粒体一次。离心收集线粒体。
6. 用200 μl PBS重悬线粒体。充分混匀。
7. 加入荧光检测用黑色96孔板。
8. 置于酶标仪中,后于激发波长为488 nm、发射波长526 nm检测荧光强度。


结果处理:
荧光强度强表示线粒体活性氧强度高。