组织活性氮(RNS)检测试剂盒-绿色荧光

BB-470576
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产品概述 product description

活性氮(reactive nitrogen species,RNS)是指NO与包括活性氧在内的化合物相互作用,生成一系列包括ONOO•及其质子形式过氧亚硝酸(HOONO)等具有高度氧化活性的自由基和硝基类化合物,这些与活性氧相对应的以NO为中心的衍生物称为活性氮。活性氮主要包括氮氧化物一氧化氮(NO)和二氧化氮(NO2)、过氧化亚硝酰阴离子(ONOO•)、亚硝酰氢(HNO)、亚硝酸根离子(NO2-)和氨等。 贝博® BBoxiProbe® 组织活性氮检测试剂盒是一种利用荧光探针BBoxiProbe® O52进行活性氮检测的试剂盒。 在活性氮存在的条件下,O52探针与活性氮反应生成强荧光物质O52F,O52F发出的绿色荧光强度与组织内活性氮水平成正比,检测O52F的荧光就可以知道组织内活性氮的水平。O52F的荧光最大激发波长是490nm,最大发射波长是516nm。 在激发波长488 nm,发射波长516 nm附近,使用荧光分光光度计、荧光酶标仪检测O52F 荧光,从而测定组织内活性氮水平。 除了本试剂盒的绿色荧光检测方法,贝博® 还可以提供红色荧光、紫色荧光的活性氮检测试剂盒产品。 贝博® BBoxiProbe® 还可以为您提供各种细胞样本、冰冻切片样本的活性氧、活性氮等各种颜色的检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。

保存温度
-20℃ 避光
注意事项
1.避免反复冻融。
2.可以根据需要分装后冻存。
3.探针为DMSO溶液,在2-8℃时是固体状态,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
有效期
6个月
检测方法
荧光分光光度计或荧光酶标仪
适用样本
新鲜组织
产品特点
1.使用方便:可用激光共聚焦显微镜直接观察、荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测;
2.背景低,灵敏度高;
3.线性范围宽,使用方便。
仪器准备
1.荧光分光光度计或荧光酶标仪,
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
PBS缓冲液或者HBSS
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
4.荧光检测专用黑色96孔板
使用注意事项
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
2.O52染色液为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3.使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间,以减少各种可能的误差。

使用方法
试剂准备:
根据样本数量,用纯水将O52探针10倍稀释,配制成探针工作液。充分混匀,备用。

样本处理:
1. 刚取得的新鲜组织样本用PBS洗净。
2. 准确称取50 mg或100 mg组织样本,加入500 μl-1 ml匀浆缓冲液A,用匀浆机/匀浆器充分匀浆。

样本检测:
1. 在96孔板中加入190微升匀浆上清液、10微升O52探针工作液,用移液器吹打,使之充分混匀。
2. 在37℃避光孵育30分钟。
3. 置于酶标仪中,后于激发波长为488 nm、发射波长530 nm检测荧光强度。

蛋白定量:
1. 另取50微升上清匀浆液,用PBS大约稀释20-30倍。
2. 取100微升进行蛋白定量,测定蛋白浓度(mg/ml)。

结果处理:
以荧光强度(RFU)/蛋白浓度(毫克蛋白)表示组织活性氮强度。
参考文献
1.Gang Zhong et al.
Dopamine-melanin nanoparticles scavenge reactive oxygen and nitrogen species and activate autophagy for osteoarthritis therapy
Nanoscale 2019 (IF=7.233)

2.Yingjun Zhou et al.
Respiratory exposure to nano‐TiO2 induces pulmonary toxicity in mice involving reactive free radical‐activated TGF‐β/Smad/p38MAPK/Wnt pathways
Journal of Biomedical Materials Research 2019 (IF=3.525)

3.Weiliang Guan et al.
Impacts of a novel live shrimp (Litopenaeus vannamei) water-free transportation strategy on flesh quality: Insights through stress response and oxidation in lipids and proteins
Aquaculture 2020 (IF=3.224)

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