2-8℃ 避光

开盖后组份按要求条件保存。

6个月

分光光度计

血清血浆/全血/组织/细胞

分光光度计

1.分光光度计
2.恒温水浴锅
3.涡旋混匀器
4.离心机
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒

1.纯水

1.试管
2.吸头
3.离心管

1. 一般的含脂类的样本都可以按这个操作表操作，排除脂类对测定的干扰；

试剂配制
1. 试剂A，天冷时或放冰箱会有部分结晶析出，需37℃水浴溶解后再用；
试剂A工作液的配制：用时每瓶5ml试剂A加纯水稀释至50ml，4℃保存，1年有效。
2. 试剂D工作液的配制：按试剂D1：D2=1:14比例配制，现配现用，4℃保存。
3. 试剂E，使用前加入70-80℃热纯水37.5ml溶解，配好后4℃避光保存。
4. 试剂F，使用前加入纯水37.5ml溶解，配好后4℃避光保存。
5. 显色剂配制：按试剂E溶液：试剂F溶液：冰乙酸=3:3:2的体积比配成显色剂，4℃避光保存，3个月有效。
6. Vc标准品储备液配制：一支Vc标准品中加纯水定容至5ml，配制后当天使用。
7. 0.15mg/ml Vc标准品工作液配制：1mlVc标准品储备液加4ml纯水5倍稀释，现配现用，30分钟有效。（Vc标准品配制后见光极易分解）

操作步骤：
按下表在试管中添加试剂：
混匀，静置10分钟，纯水调零，550nm，1cm光径，测各管OD值。

结果计算：
1. 血清（血浆）中抗超氧阴离子自由基活力单位的计算
定义：
在反应体系中，每升血清（血浆）在37℃反应40分钟所抑制的超氧阴离子自由基相当于1mg维生素C所抑制的超氧阴离子自由基的变化值为一个活力单位。

计算公式：
抗超氧阴离子 =（对照OD -测定OD）×标准品浓度 ×1000ml×样品测试前
活力单位（U/L） （对照OD -标准OD） （0.15mg/ml） 稀释倍数

2. 组织中抗超氧阴离子自由基活力单位的计算
定义：
在反应体系中，每克组织蛋白在37℃反应40分钟所抑制的超氧阴离子自由基相当于1mg维生素C所抑制的超氧阴离子自由基的变化值为一个活力单位。

计算公式：
抗超氧阴离子 = （对照OD -测定OD）×标准品浓度 ×1000ml÷待测样品蛋白
活力单位（U/gprot） （对照OD -标准OD） （0.15mg/ml） 浓度gprot/L

本试剂盒可检测白细胞，某些中西药物等样品产生超氧阴离子的改变。
计算公式如下：
1.定义：在反应体系中，每升（克）物质在37℃反应40分钟所抑制的超氧阴离子自由基相当于1mg维生素C所抑制的超氧阴离子自由基的变化值为一个活力单位。

2.计算公式：

公式一：

产生超氧阴离子=（测定OD –对照OD）×标准品浓度 ×1000ml×样品测试前
活力单位（U/L）（对照OD -标准OD） （0.15mg/ml） 稀释倍数

公式二：

产生超氧阴离子=（测定OD –对照OD）×标准品浓度 ×1000ml÷样品浓度
活力单位（U/g） （对照OD -标准OD） （0.15mg/ml） （g/L）





附录：脂类样本的测定

1. 操作表

2. 计算公式
定义：
在反应体系中，每升血清（血浆）在37℃反应40分钟所抑制的超氧阴离子自由基相当于1mg维生素C所抑制的超氧阴离子自由基的变化值为一个活力单位。

计算公式：
抗超氧阴离子= （测定空白OD -测定OD×标准品浓度×1000ml×样品测试前
活力单位（U/L） （对照OD -标准OD） （0.15mg/ml） 稀释倍数

3. 注意事项
① 一般的含脂类的样本都可以按这个操作表操作，排除脂类对测定的干扰；
② 三氯甲烷需要自备，并且对于一些重度高脂，有可能会出现加完与样本等量的三氯甲烷后上清还是浑浊，则需加大三氯甲烷的量，再次混匀离心至上清澄清。