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产品概述
product description
GSH是一种低分子自由基清除剂，它可清除O2-、H2O2、LOOH。还原型谷胱甘肽是蛋氨酸、甘氨酸和半胱氨酸组成的一种小分子肽，是组织中主要的非蛋白质的巯基化合物，并且是GPX和GST两种酶类的底物，为这二种酶分解氢过氧化物所必需，并且能稳定含巯基的酶和防止血红蛋白及其它辅因子受氧化损伤。最近还证明GSH也参与使VE恢复到还原态的作用。GSH在防止动脉粥样硬化、冠心病、防衰老、抗肿瘤、防老年性痴呆等疾病的预防、恢复、治疗的研究过程中起到重要参考作用。 本试剂盒测仅用于科研领域，不可用于临床诊断或其他用途。 贝博® BBcellProbe® 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 贝博® BBcellProbe® 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。
保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
开盖后组份按要求条件保存。
有效期
6个月
检测方法
分光光度计
适用样本
血清血浆/全血/组织
产品应用
分光光度计
仪器准备
1.分光光度计
2.离心机
2.离心机
试剂准备
1.双蒸水
耗材准备
1.一次性手套
2.吸头
2.吸头
使用注意事项
1.血液中的GSH几乎全部存在于红细胞内，可以用每升全血中GSH的克数来表示，也可用每克Hb中GSH含量来表示；
2.计算时应用消光系数，故比色计要校正波长。用标准管计算较方便、准确；
3.吸取上清时，最好用带刻度的5ml滴管，或者移液器，避开表面的一层薄膜，插到上清液中吸取2ml做显色反应；
4.最好每批实验做2个标准管、空白管，以减少操作误差；
2.计算时应用消光系数，故比色计要校正波长。用标准管计算较方便、准确；
3.吸取上清时，最好用带刻度的5ml滴管，或者移液器，避开表面的一层薄膜，插到上清液中吸取2ml做显色反应；
4.最好每批实验做2个标准管、空白管，以减少操作误差；
使用方法
试剂工作液配制 ：
1. 试剂A1的配制：粉剂A1:加90-100℃的热双蒸水170ml，充分完全溶解；
2. 试剂A工作液：将已配制好的试剂A1与试剂A1充分混合。此为过饱和溶液，室温静置冷却后，如果有结晶，则取上清进行实验，室温6个月有效；
3. 试剂B的配制：粉剂B：用时加双蒸水200 ml溶解，室温保存6个月；
4. 试剂C的配制：粉剂C：用时加双蒸水50 ml溶解，避光4℃保存6个月；
5. 试剂D的配制：粉剂D*4支：用时每支加双蒸水10 ml溶解，避光冷藏可保存5天；
6. GSH标准溶剂工作液：
溶剂储备液：双蒸水=1：9稀释，即为GSH标准溶剂工作液，现用现配。
7. 1 mmol/LGSH标准溶液的配制：GSH分子量为307，每次测定前将3.07 mg的GSH标准品加到10 mlGSH的溶剂工作液中，混匀，现用现配。
20 μmol/LGSH标准溶液的配制:取1mmol/LGSH标准溶液0.2 ml加GSH标准溶剂工作液9.8 ml，现用现配。
样本的前处理：
1. 血清（浆）：直接取原液检测。
2. 全血样本的处理：1:9溶血液的制备：取0.1 ml肝素抗凝全血加双蒸水0.9 ml，充分混匀，直至透亮为止；
3. 组织样本：10%匀浆液的制备：准确称取组织重量，按重量（g）：体积（ml）=1:9比例加入9倍体积的生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，2500转/分，离心10min，取上清液待测；
操作步骤（仅供参考）
1、上清液制备：
取待测样本0.5 ml,加试剂A工作液2 ml混匀，3500～4000转/分离心10分钟， 取上清液1ml进行显色反应。
3、计算：
（1）按标准品计算：
GSH含量 = 测定OD值 – 空白OD值 x 标准品浓度 x GSH分子量 x 样本测定前
（gGSH/L） 标准OD值 - 空白OD值 （20x10-6mol/L） (307) 稀释倍数
注：标准品浓度为20 μmol/L=20x10-6mol/L
（2）按标准曲线法查表
100 μmol/LGSH标准溶液的配制:将1 mmol/LGSH标准溶液与GSH标准溶剂工作液按1：9比例进行10倍稀释；
全血样本的计算：
（1） 按全血体积进行换算：
全血中GSH含量 = 测定OD值 – 空白OD值 x 标准品浓度 x GSH分子量 x 样本测定前
（gGSH/L） 标准OD值 - 空白OD值 （20x10-6mol/L） (307) 稀释倍数
（2） 按血红蛋白浓度进行换算：
全血中GSH含量 = 测定OD值 – 空白OD值 x 标准品浓度 x GSH分子量 x 样本测定前
（gGSH/gHb） 标准OD值 - 空白OD值 （20x10-6mol/L） (307) 稀释倍数
÷血红蛋白浓度（gHb/L）
注：1.标准品浓度为20μmol/L=20x10-6mol/L
2.样本测试前稀释倍数=溶血液制备时稀释倍数（10倍）x上清制备时稀释倍数（5倍）
组织样本的计算：
组织中GSH含量 = 测定OD值 – 空白OD值 x 标准品浓度 x GSH分子量 x 样本测定前
（mgGSH/gprot） 标准OD值 - 空白OD值 （20x10-3mmol/L） (307) 稀释倍数
÷待测匀浆蛋白浓度（gprot/L）
1. 试剂A1的配制：粉剂A1:加90-100℃的热双蒸水170ml，充分完全溶解；
2. 试剂A工作液：将已配制好的试剂A1与试剂A1充分混合。此为过饱和溶液，室温静置冷却后，如果有结晶，则取上清进行实验，室温6个月有效；
3. 试剂B的配制：粉剂B：用时加双蒸水200 ml溶解，室温保存6个月；
4. 试剂C的配制：粉剂C：用时加双蒸水50 ml溶解，避光4℃保存6个月；
5. 试剂D的配制：粉剂D*4支：用时每支加双蒸水10 ml溶解，避光冷藏可保存5天；
6. GSH标准溶剂工作液：
溶剂储备液：双蒸水=1：9稀释，即为GSH标准溶剂工作液，现用现配。
7. 1 mmol/LGSH标准溶液的配制：GSH分子量为307，每次测定前将3.07 mg的GSH标准品加到10 mlGSH的溶剂工作液中，混匀，现用现配。
20 μmol/LGSH标准溶液的配制:取1mmol/LGSH标准溶液0.2 ml加GSH标准溶剂工作液9.8 ml，现用现配。
样本的前处理：
1. 血清（浆）：直接取原液检测。
2. 全血样本的处理：1:9溶血液的制备：取0.1 ml肝素抗凝全血加双蒸水0.9 ml，充分混匀，直至透亮为止；
3. 组织样本：10%匀浆液的制备：准确称取组织重量，按重量（g）：体积（ml）=1:9比例加入9倍体积的生理盐水，冰水浴条件下机械匀浆，2500转/分，离心10min，取上清液待测；
操作步骤（仅供参考）
1、上清液制备：
取待测样本0.5 ml,加试剂A工作液2 ml混匀，3500～4000转/分离心10分钟， 取上清液1ml进行显色反应。
3、计算：
（1）按标准品计算：
GSH含量 = 测定OD值 – 空白OD值 x 标准品浓度 x GSH分子量 x 样本测定前
（gGSH/L） 标准OD值 - 空白OD值 （20x10-6mol/L） (307) 稀释倍数
注：标准品浓度为20 μmol/L=20x10-6mol/L
（2）按标准曲线法查表
100 μmol/LGSH标准溶液的配制:将1 mmol/LGSH标准溶液与GSH标准溶剂工作液按1：9比例进行10倍稀释；
全血样本的计算：
（1） 按全血体积进行换算：
全血中GSH含量 = 测定OD值 – 空白OD值 x 标准品浓度 x GSH分子量 x 样本测定前
（gGSH/L） 标准OD值 - 空白OD值 （20x10-6mol/L） (307) 稀释倍数
（2） 按血红蛋白浓度进行换算：
全血中GSH含量 = 测定OD值 – 空白OD值 x 标准品浓度 x GSH分子量 x 样本测定前
（gGSH/gHb） 标准OD值 - 空白OD值 （20x10-6mol/L） (307) 稀释倍数
÷血红蛋白浓度（gHb/L）
注：1.标准品浓度为20μmol/L=20x10-6mol/L
2.样本测试前稀释倍数=溶血液制备时稀释倍数（10倍）x上清制备时稀释倍数（5倍）
组织样本的计算：
组织中GSH含量 = 测定OD值 – 空白OD值 x 标准品浓度 x GSH分子量 x 样本测定前
（mgGSH/gprot） 标准OD值 - 空白OD值 （20x10-3mmol/L） (307) 稀释倍数
÷待测匀浆蛋白浓度（gprot/L）
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