2-8℃ 避光

开盖后组份按要求条件保存。

6个月

酶标仪

血清血浆、尿液、细胞、组织等，

酶标仪

1.酶标仪
2.恒温箱
3.混匀器
4.移液器
5.冰盒

1.纯水

1.96孔板
2.吸头

1.抗凝剂用肝素钠-氟化钠较好。抗凝血样品置于冰浴中送检，尽快分离出血浆等。
2.如果没有酶标仪，也可以使用分光光度计测定，检测样品量会相应减少；

样品准备：
1. 血浆、血清、尿液及其他体液样品：
血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-20℃冻存。
2. 细胞或组织样品：
取0.5g组织样品，加入组织匀浆液，仔细研磨，转移至新的离心管中，清洗研磨器一并倒入离心管中，补组织匀浆液至9ml，充分混匀，4000g离心10min，取上清，-20℃冻存，用于丙酮酸的检测。
3. 高浓度样品：
如果样品中含有较高浓度的丙酮酸，可以使用原有的裂解液或PBS等进行稀释，如鸡血清、血浆可稀释5～10倍后检测。
4. 植物样本：
称取100mg植物样本置于研钵内，加入适量组织匀浆液仔细研磨，用匀浆液定容至1ml，振摇提取，静置30min，取上清液4000g离心10min，取上清液备用。

配制标准品工作液：
如果检测血清、血浆、尿液等样品，取丙酮酸标准(6mg/ml)，按取丙酮酸标准(6mg/ml)：蒸馏水=1：99的比例配制，使浓度达到60μg/ml；

如果检测组织样品，取丙酮酸标准(6mg/ml)，按丙酮酸标准(6mg/ml)：组织匀浆液B=1：99的比例配制，使浓度达到60μg/ml。4℃避光保存24h有效。
加样：
按照下表设置空白孔、标准孔、样品孔，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的丙酮酸浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品检测最好能设置平行管。
丙酮酸检测：
充分混匀，其中空白呈淡黄色，标准孔依次呈不同程度的棕红色；用酶标仪，空白孔调零，比色杯光径1.0cm，测定标准孔、样品孔的520nm吸光度（即A标准，A样品）

计算：
以各丙酮酸标准浓度为横坐标，以各丙酮酸标准A标准为纵坐标，绘制丙酮酸标准曲线。
血清、血浆、尿液等的丙酮酸含量直接根据标准曲线求得。

组织丙酮酸（mg/g）=A x N/(M x 100)
式中：A为从标准曲线上查的丙酮酸浓度（ug/ml）
N为稀释倍数
M为样品的质量（g）