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产品概述
product description
贝博® BBoxiProbe® 血清活性氧检测试剂盒是一种利用新型荧光探针BBoxiProbe® O13进行血清中活性氧检测的试剂盒。本试剂盒中的BBoxiProbe® O13 ROS探针为红色荧光的活性氧探针，具有536 / 610 nm的最大激发/发射波长。 贝博® BBoxiProbe® O13 ROS探针在血清中活性氧存在的条件下，被氧化生成红色荧光物质，红色荧光强度与血清内活性氧水平成正比，检测O13产物的荧光强度就可以知道血清内活性氧的水平。 在激发波长536 nm，发射波长610 nm附近，使用荧光分光光度计、荧光酶标仪、等检测O13产物荧光，从而测定血清内活性氧水平。 本试剂盒可以用于各种动物血清样本的检测。 一般最好使用新鲜血清样本检测活性氧，反映的是组织当时的活性氧状态。冻存的血清样本的ROS在长期冻存过程中会损失掉，有条件的话就使用新鲜样本，不建议使用冻存的血清样本。已经冻存的血清样本中残余的ROS也可以用本试剂盒检测。 以每个血清样本100 μl计，本试剂盒小包装可以染色100个样本。
保存温度
-20℃ 避光
注意事项
1.避免反复冻融。
2.可以根据需要分装后冻存。
3.探针为DMSO溶液，在2-8℃时是固体状态，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
2.可以根据需要分装后冻存。
3.探针为DMSO溶液，在2-8℃时是固体状态，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
有效期
6个月
检测方法
1.荧光分光光度计2.荧光酶标仪
适用样本
血清
产品特点
1.使用方便：可用荧光分光光度计、荧光酶标仪检测；
2.背景低，灵敏度高；
3.线性范围宽，使用方便。
2.背景低，灵敏度高；
3.线性范围宽，使用方便。
仪器准备
1.荧光分光光度计或荧光酶标仪，
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
纯水或PBS缓冲液或者HBSS
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套 4.荧光专用黑色透明底96孔板
2.吸头
3.一次性手套 4.荧光专用黑色透明底96孔板
使用注意事项
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
2.O13染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3.使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。
5.必须使用荧光检测专用的黑色96孔板。
2.O13染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3.使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。
5.必须使用荧光检测专用的黑色96孔板。
使用方法
试剂准备：
根据样本数量，用纯水将O13探针10倍稀释。充分混匀，备用。
样本检测：
1. 在96孔板中加入100微升新鲜血清样本、10-20微升O13探针，用移液器吹打，使之充分混匀。
2. 在37℃避光孵育15-30分钟。
3. 置于荧光光度计或酶标仪中，后于激发波长为535 nm、发射波长610 nm检测荧光强度。
常见问题分析
1.活性氧结果如何分析？
ROS是多种物质的统称，不像某一单一活性氧指标，无法检测其绝对的含量，只能通过设置参照样本，以参照样本的倍数来反映目标样本相对含量变化，这个“相对”是针对参照的。分析结果是定性的，也是没有单位的，因为它本质上是一个比值（目标/参照）。反映的是模型样本通过具体的干预措施（如养分缺失、缺氧、药物治疗或遗传基因操控等）如何影响其ROS的变化，测定其ROS是增加或者降低了。
ROS是多种物质的统称，不像某一单一活性氧指标，无法检测其绝对的含量，只能通过设置参照样本，以参照样本的倍数来反映目标样本相对含量变化，这个“相对”是针对参照的。分析结果是定性的，也是没有单位的，因为它本质上是一个比值（目标/参照）。反映的是模型样本通过具体的干预措施（如养分缺失、缺氧、药物治疗或遗传基因操控等）如何影响其ROS的变化，测定其ROS是增加或者降低了。
参考文献
1.Lu Li et al.
Neutrophil Extracellular Traps Promote Aberrant Macrophages Activation in Behçet’s Disease
Frontiers in Immunology 2021 （IF=7.561）
Neutrophil Extracellular Traps Promote Aberrant Macrophages Activation in Behçet’s Disease
Frontiers in Immunology 2021 （IF=7.561）
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