血清过氧亚硝基阴离子（ONOO-）检测试剂盒-红色荧光

BB-475024
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产品概述 product description

贝博® BBoxiProbe® 血清过氧亚硝基阴离子（ONOO–）检测试剂盒是一种利用新型荧光探针BBoxiProbe® O72进行血清中过氧亚硝基阴离子（ONOO–）检测的试剂盒。本试剂盒中的BBoxiProbe® O72 ROS探针为红色荧光的过氧亚硝基阴离子（ONOO–）探针，具有516 / 606nm的最大激发/发射波长。 贝博® BBoxiProbe® O72探针在血清中过氧亚硝基阴离子（ONOO–）存在的条件下，被氧化生成红色荧光物质，红色荧光强度与血清内过氧亚硝基阴离子（ONOO–）水平

保存温度
-20℃ 避光
注意事项
1.避免反复冻融。
2.可以根据需要分装后冻存。
3.探针为DMSO溶液，在2-8℃时是固体状态，冬季气温较低时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
有效期
6个月
检测方法
荧光分光光度计或荧光酶标仪
适用样本
血清
产品特点
1.使用方便：可用荧光分光光度计、荧光酶标仪检测； 2.背景低，灵敏度高； 3.线性范围宽，使用方便。
仪器准备
1.荧光分光光度计或荧光酶标仪，
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
PBS缓冲液或者HBSS
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
4.荧光检测专用黑色96孔板
使用注意事项
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。 2.荧光探针标记后，一定要洗净残余的未进入细胞内的探针，否则会导致背景较高。
3.探针标记完毕并洗净残余探针后，可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描，以确认探针的标记情况是否正常。
4.尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。
5.原位检测必须使用荧光检测专用的黑色透明底96孔细胞培养板。
6.以下操作步骤仅供参考，请根据实际样本情况调整或参考文献。
使用方法
试剂准备： 根据样本数量，用纯水将O72探针10倍稀释。充分混匀，配制成探针工作液，备用。 【注】：  不可以一次性将探针全部稀释。  现配现用。  也可以不稀释探针，直接在待检测血清样品中加入1-2 μl探针，但是需要用好的移液器和吸头，注意操作过程，保证探针有效的加入了样品中，并充分混匀。 样本检测： 1. 在96孔板中加入100微升新鲜血清样本、10-20微升O72探针工作液，用移液器吹打，使之充分混匀。 【注】：  注意选择合适的96孔板，荧光检测需要使用黑色板。  不同样本的活性氧差异较大，需要根据预实验结果调整探针用量。一般加入2-10 μl探针，染色终浓度按试剂盒中探针母液的200-1000倍稀释，200倍稀释适合大多数样本。  如果荧光强度太强，超过了检测仪器的量程，可以减少探针用量。保证所有样本探针用量一致即可。  以酶标仪检测为例。也可以用荧光分光光度计检测，根据所使用仪器决定液体体积和染色容器。 2. 在37℃避光孵育15-30分钟。 3. 置于荧光光度计或酶标仪中，后于激发波长为516 nm、发射波长606 nm检测荧光强度。 【注】：  必须使用荧光检测专用的黑色96孔板。  如果荧光强度太强，超过了仪器的检测范围，可以将孵育后的匀浆上清液稀释后再检测。一般稀释5-50倍。  荧光强度强则过氧亚硝基阴离子（ONOO–）含量高。  可以用实验中对照血清的荧光强度值为基准，待测组血清的荧光强度值占对照血清的百分比来比较过氧亚硝基阴离子（ONOO–）程度差异。
参考文献
 Xiqing Cheng et al. Biomimetic Metal–Organic Framework Composite-Mediated Cascade Catalysis for Synergistic Bacteria Killing ACS Applied Materials & Interfaces 2020 （IF=8.758）

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