

产品概述
product description
贝博® BBcellProbe® 线粒体自噬检测试剂盒是采用线粒体变色荧光探针方法检测线粒体自噬的试剂盒。 线粒体自噬发生后,被线粒体自噬绿色荧光探针M58标记的绿色线粒体被溶酶体吞噬,进入溶酶体后,变成红色荧光的线粒体自噬溶酶体。
保存温度
2-8℃ 避光
注意事项
1.长期不用可以-20℃保存。
2.染色探针液避免反复冻融。多次冻融会导致失效。
3.染色液需要长期保存时可以根据使用情况进行小量分装后-20℃避光保存。
4.试剂拆封后请尽快使用完!
2.染色探针液避免反复冻融。多次冻融会导致失效。
3.染色液需要长期保存时可以根据使用情况进行小量分装后-20℃避光保存。
4.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
6个月
检测方法
激光共聚焦/荧光显微镜
适用样本
悬浮细胞 /贴壁细胞
仪器准备
1. 激光共聚焦/荧光显微镜
2. 离心机
3. 移液器
4. 冰箱
5. 冰盒
2. 离心机
3. 移液器
4. 冰箱
5. 冰盒
试剂准备
PBS缓冲液或者HBSS
耗材准备
1. 离心管
2. 吸头
3. 一次性手套
4. 铝箔
2. 吸头
3. 一次性手套
4. 铝箔
使用注意事项
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体损失导致试剂量不够用。
2.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。离心力在不损失细胞的前提下尽可能小,重悬细胞是动作要轻柔,避免多次反复的激烈吹打。不用涡旋振荡器。
2.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。离心力在不损失细胞的前提下尽可能小,重悬细胞是动作要轻柔,避免多次反复的激烈吹打。不用涡旋振荡器。
使用方法
染色工作液配制:
1. 根据样本数量,用染料稀释液将BBcellProbe® M58荧光染料10倍稀释,再用HBSS缓冲液50倍稀释。
细胞染色:
2.1 对于贴壁细胞
1)培养皿/培养板准备细胞样本。
2)待细胞生长到合适丰度,吸除培养液,加入适量37℃预热的含M58探针工作液。于生长状态下孵育15分钟~45分钟(具体孵育时间需根据细胞类型而定,需预实验优化)。
3)利用新鲜培养基替换上述染色液。
2.2 对于悬浮细胞
1)离心,吸除上清。
2)利用37℃预热的M58探针工作液重悬细胞,于生长状态下孵育15分钟~45分钟(具体时间需根据细胞类型而定,需预实验优化)。
3)离心,吸除染色液,加入新鲜培养液重悬细胞。
4)或者进行后续的固定步骤。
药物处理:
3. 根据实验需要处理细胞。
激光共聚焦/荧光显微镜观察:
4. 在激光共聚焦/荧光显微镜下观察。
1. 根据样本数量,用染料稀释液将BBcellProbe® M58荧光染料10倍稀释,再用HBSS缓冲液50倍稀释。
细胞染色:
2.1 对于贴壁细胞
1)培养皿/培养板准备细胞样本。
2)待细胞生长到合适丰度,吸除培养液,加入适量37℃预热的含M58探针工作液。于生长状态下孵育15分钟~45分钟(具体孵育时间需根据细胞类型而定,需预实验优化)。
3)利用新鲜培养基替换上述染色液。
2.2 对于悬浮细胞
1)离心,吸除上清。
2)利用37℃预热的M58探针工作液重悬细胞,于生长状态下孵育15分钟~45分钟(具体时间需根据细胞类型而定,需预实验优化)。
3)离心,吸除染色液,加入新鲜培养液重悬细胞。
4)或者进行后续的固定步骤。
药物处理:
3. 根据实验需要处理细胞。
激光共聚焦/荧光显微镜观察:
4. 在激光共聚焦/荧光显微镜下观察。
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