

产品概述
product description
贝博®BBcellProbe®细菌外膜通透性检测试剂盒是采用绿荧光探针检测细菌外膜通透性改变情况。
N53 荧光探针在溶液中荧光较弱,不能自由穿透完整的细菌外膜,当细菌外膜通透性增加,N53 探针会进入细菌外膜,荧光强度会大幅度增加,从而可以通过测定荧光强度来检测细菌外膜通透性变化。
保存温度
2-8℃避光
注意事项
1.试剂 A 短期 4℃避光保存,长期-20℃℃避光保存:避免反复冻融。
2.试剂 A 在冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。融解后离心至管底部再打开螺旋盖。可以用手捂住使其融解或 37°C短时间水浴。
2.试剂 A 在冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。融解后离心至管底部再打开螺旋盖。可以用手捂住使其融解或 37°C短时间水浴。
有效期
6个月
检测方法
荧光酶标仪/荧光光度计/激光共聚焦显微镜
适用样本
细菌
产品应用
荧光酶标仪/荧光光度计/激光共聚焦显微镜
仪器准备
1.荧光酶标仪/荧光光度计/激光共聚焦显微镜
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
2.生理盐水
3.纯水
2.生理盐水
3.纯水
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
4.黑色透明底细胞培养板
2.吸头
3.一次性手套
4.黑色透明底细胞培养板
使用注意事项
N53试剂避光保存,使用过程中尽量避光。
使用方法
一、试剂配制
根据待测样品数,用试剂 B将试剂 A进行 500-1000 倍稀释,制备成染色工作液 A,
充分混匀置冰上备用。
二、样品处理
1.制备待测细菌细胞模型,小心吸取培养基,尽可能吸干。
2.:用冷 PBS 或生理盐水洗涤细菌两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
3.在细菌中加入 200ul 染色工作液 A,37℃避光孵育 60 分钟。
4.用洗涤缓冲液C洗涤细菌一次。
5.再次用洗涤缓冲液洗细菌一次。
6.在每孔中 100ul 检测缓冲液。
三、通透性检测
1.用荧光设备检测细菌外膜通透性变化情况。
激发波长 535 nm,发射波长 620 nm。
2.荧光强度与外膜通透性增加程度成正比。
根据待测样品数,用试剂 B将试剂 A进行 500-1000 倍稀释,制备成染色工作液 A,
充分混匀置冰上备用。
二、样品处理
1.制备待测细菌细胞模型,小心吸取培养基,尽可能吸干。
2.:用冷 PBS 或生理盐水洗涤细菌两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
3.在细菌中加入 200ul 染色工作液 A,37℃避光孵育 60 分钟。
4.用洗涤缓冲液C洗涤细菌一次。
5.再次用洗涤缓冲液洗细菌一次。
6.在每孔中 100ul 检测缓冲液。
三、通透性检测
1.用荧光设备检测细菌外膜通透性变化情况。
激发波长 535 nm,发射波长 620 nm。
2.荧光强度与外膜通透性增加程度成正比。
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